產(chan) 品概述
高效液相色譜儀(yi) (HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用於(yu) 分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀(yi) 器設備。它由儲(chu) 液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀(yi) 等幾部分組成。儲(chu) 液器中的流動相被高壓泵打入係統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nei) ,由於(yu) 樣品溶液中的各組分在兩(liang) 相中具有不同的分配係數,在兩(liang) 相中做相對運動時,經過反複多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chan) 生較大的差別,被分離成單個(ge) 組分依次從(cong) 柱內(nei) 流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳(chuan) 送到記錄儀(yi) ,數據以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應用於(yu) 生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。
儲(chu) 液器中的流動相被高壓泵打入檢測係統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nei) ,由於(yu) 樣本溶液中的各組分在兩(liang) 相中具有不同的分配係數,在兩(liang) 相中作相對運動時,經過反複多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動速度上產(chan) 生較大的差別,被分離成單個(ge) 組分依次從(cong) 柱內(nei) 流出,通過檢測器時,樣本濃度被轉換成電信號傳(chuan) 送到記錄儀(yi) ,數據以圖譜形式輸出檢測結果。
高效液相色譜儀(yi) 原理:
根據分離機製的不同,HPLC原理可分為(wei) 液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與(yu) 反相)、離子交換色譜法及分子排阻色譜法。
液固吸附色譜法中,固定相為(wei) 固體(ti) 吸附劑,根據各組分吸附能力差異而使組分得以分離。常用的吸附劑為(wei) 矽膠或氧化鋁,大多數用於(yu) 非離子型化合物。吸附色譜固定相可以分為(wei) 極性和非極性兩(liang) 大類。對流動相的要求為(wei) :
1) 選用的溶劑應當與(yu) 固定相互不相溶,並能保持色譜柱的穩定性。
2) 選用的溶劑應有高純度,以防所含微量雜質在柱中積累,引起柱性能的改變。
3) 選用的溶劑性能應與(yu) 所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用示差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
4) 選用的溶劑應對樣品有足夠的溶解能力,以提高測定的靈敏度。
5) 選用的溶劑應具有低的黏度和適當低的沸點。
6) 應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,以保證工作人員的安全。
液固色譜法是以表麵吸附性能力為(wei) 依據的,所以它常用於(yu) 分離極性不同的化合物,也能分離那些具有相同極性基團,但數量不同的樣品。
產(chan) 品分類
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